Logo tl.boatexistence.com

Paano bawasan ang paglamlam sa background sa immunofluorescence?

Talaan ng mga Nilalaman:

Paano bawasan ang paglamlam sa background sa immunofluorescence?
Paano bawasan ang paglamlam sa background sa immunofluorescence?
Anonim

Upang bawasan ang di-tiyak na pagbubuklod ng antibody at, bilang resulta, bawasan ang signal sa background, inirerekomenda na gumamit ng blocking solution bago ang incubation na may antibodies Ang pinakaepektibong blocking solution ay maging yaong naglalaman ng serum mula sa parehong species kung saan itinaas ang pangalawang antibody.

Paano mo maiiwasan ang mga mantsa sa background?

Ang pagpapababa sa kapal ng mga seksyon ng tissue ay maaaring makatulong na panatilihing bawasan ang paglamlam sa background. Subukang gupitin ang mas manipis na mga seksyon para sa mas malinis na IHC. Mahalaga rin na mag-ingat na huwag hayaang matuyo ang mga seksyon dahil ang pagpapatuyo ay maaaring magresulta sa mataas na hindi partikular na paglamlam.

Paano mo i-optimize ang immunofluorescence?

Immunofluorescence Microscopy: 10 Teknikal na Tip para sa Tagumpay

  1. Pag-aayos ng cell at Permeabilisation. …
  2. Pagtitiyak ng Antibody. …
  3. Paggamit ng naaangkop na pagbabanto ng antibody. …
  4. Pag-optimize ng Mga Buffer at Mga Ahente sa Pag-block. …
  5. Paggamit ng Naaangkop na Cell Density. …
  6. Multiple Staining. …
  7. Secondary Antibodies. …
  8. Pagbabawas ng Background.

Ano ang nagiging sanhi ng paglamlam sa background?

Ang paglamlam sa background ay maaaring sanhi ng hindi naaangkop na pagbubuklod ng antibody o dahil sa mga pagkakamali habang naghahanda ng tissue slide.

Pinababawasan ba ng mga pangalawang antibodies ang mga signal sa background?

Maaaring makatulong ang

F(ab) na partikular na pangalawang antibodies na bawasan ang signal sa background sa pamamagitan ng pag-aalis ng hindi tiyak na pagbubuklod ng ang mga protina ng IgG na matatagpuan sa mga tisyu ng pangalawang antibody.

Inirerekumendang: