Ang sumusunod ay isang pangkalahatang-ideya ng iba't ibang hakbang ng isang hindi direktang immunofluorescence staining protocol
- Pagpaplano ng Eksperimento at Paghahanda ng Sample. …
- Sample na Pag-aayos. …
- Cell Permeabilisation. …
- Pagba-block. …
- Pangunahing Antibody Incubation. …
- Secondary Antibody Incubation. …
- Counterstain and Mounting.
Paano ka nagsasagawa ng immunofluorescence?
Ang lahat ng hakbang sa pagpapapisa ng itlog ay nagaganap sa temperatura ng silid
- Hugasan ang mga cell nang dalawang beses at gumamit ng mga sipit upang maingat na ilagay ang coverslip na may mga nakataas na cell sa humidified chamber.
- Ayusin gamit ang 4 % formaldehyde sa loob ng 10 minuto at hugasan ng 3 ×.
- Permeabilize na may 0.1 % TX-100/PBS sa loob ng 15–20 minuto at hugasan ng 3 ×.
Paano mo ginagamit ang immunofluorescence sa isang cell?
Immunofluorescence protocol para sa mga nakadikit na cell
- Seed 1–1.5 x104 cell bawat balon ng 4-chamber slide sa 500 mL ng culture medium. I-incubate sa 37°C sa 5% CO2.
- 32–36 na oras pagkatapos ng cell seeding, alisin ang cell culture medium at banlawan ang mga cell nang 3 beses gamit ang 500 µL ng 1X PBS.
Ano ang isang halimbawa ng immunofluorescence?
Halimbawa, maaaring lumikha ang isang mananaliksik ng pangunahing antibodies sa isang kambing na kumikilala ng ilang antigens, at pagkatapos ay gumamit ng dye-coupled rabbit secondary antibodies na kumikilala sa goat antibody constant region (" rabbit anti-goat" antibodies).
Ano ang gamit ng immunofluorescence staining?
Ang
Immunofluorescence (IF) staining ay isang malawakang ginagamit na technique sa biological research at clinical diagnostics IF ay gumagamit ng fluorescent-labeled antibodies upang matukoy ang mga partikular na target na antigens. Sinusundan ng imaging, isa itong napakadirektang diskarte dahil may makikita ka talaga.
